La streptomicina ELISA Test Kit del ™ di REAGEN è un immunotest enzimatico competitivo per l'analisi quantitativa di streptomicina e di diidrostreptomicina in alimentazione, miele, rene, fegato, carne (manzo, pollo e carne di maiale), latte, siero ed urina.
Tipo del campione |
Limite di segnalazione (ng/g o ppb) |
Alimentazione |
5 |
Miele |
2 |
Carne/fegato/rene |
5 |
Latte |
1 |
Di latte in polvere |
1 |
Siero/urina |
0,5 |
Analiti |
Reattività crociata (%) |
Streptomicina |
100 |
Rapida (10 - 30 minuti) e metodi senza reagente organici dell'estrazione per vari campioni con il recupero di livello (75 - 115%).
Alta sensibilità (0,05 ng/g o ppb) e limite di segnalazione basso (1 ng/g o ppb per carne e latte).
Alta riproducibilità.
Un'analisi rapida di ELISA (meno di 2 ore indipendentemente dal numero dei campioni).
Il metodo è basato su un'analisi colorimetrica competitiva di ELISA. L'anticorpo della streptomicina è stato ricoperto nei pozzi della piastrina. Durante l'analisi, il campione si aggiunge con il coniugato della perossidasi del streptomicina-rafano. Se il residuo della streptomicina è presente nel campione, competerà per l'anticorpo della streptomicina, quindi impedendo la streptomicina-HRP legare all'anticorpo allegato al pozzo. L'intensità del colore risultante, dopo l'aggiunta del substrato di HRP (TMB), ha una relazione inversa con la concentrazione del residuo della streptomicina nel campione.
Identifichi le diverse strisce che saranno usati ed i reagenti di aliquota come il seguente esempio:
Componente |
Volume per reazione |
24 reazioni |
Anticorpo #1 della streptomicina |
50 ml |
1,2 ml |
Anticorpo HRP-coniugato #2 |
50 ml |
1,2 ml |
soluzione del lavaggio 1X |
2,0 ml |
48 ml |
Amplificatore di arresto |
100 ml |
2,4 ml |
Substrato di TMB |
100 ml |
2,4 ml |
Aggiunga 50uL delle norme di ogni streptomicina due volte nei pozzi differenti (F aggiunge le norme per placcare soltanto nell'ordine da concentrazione bassa ad alta concentrazione).
Aggiunga l'UL 50 di ogni campione due volte nei pozzi differenti del campione.
Aggiunga l'UL 50 dell'anticorpo #2 HRP-Coniugare e 50mL l'anticorpo #1 ad ogni pozzo, si mescola bene delicatamente oscillando il piatto manualmente per 1 minuto.
Incubi il piatto per 30 minuti alla temperatura ambiente (20 – 25°C/68 – 77°F) ( F evita la luce solare diretta e le cime fredde del banco durante l'incubazione. Copertura del piatto di microtitolo mentre incubare è raccomandata).
Lavi il piatto 5 volte con l'UL 250 della soluzione del lavaggio 1X. Dopo l'ultimo lavaggio, inverta il piatto e delicatamente spilli l'essiccatoio a piatti sugli asciugamani di carta (F esegue il punto seguente subito dopo dei lavaggi del piatto. Non lasci che il piatto si asciughi all'aria fra i punti di funzionamento).
Aggiunga l'UL 100 del substrato di TMB. Cronometri la reazione subito dopo dell'aggiunta del substrato. Mescoli la soluzione delicatamente oscillando il piatto manualmente per 1 minuto mentre incubano ( F non mette alcun substrato di nuovo al contenitore originale per evitare alcuna contaminazione potenziale. Tutta la soluzione del substrato che esibisce la colorazione è indicativa di deterioramento e dovrebbe essere scartata. Copertura del piatto di microtitolo mentre incubare è raccomandata).
Dopo l'incubazione per 15 minuti alla temperatura ambiente (20 – 25°C/68 – 77°F), aggiunga l'UL 100 dell'amplificatore di arresto per fermare la reazione enzimica.
Legga il piatto appena possibile che segue l'aggiunta dell'amplificatore di arresto su un lettore del piatto con la lunghezza d'onda di 450 nanometro (F prima di lettura, usa una strofinata senza filaccia sul fondo del piatto per assicurare che nessun'umidità o impronta digitale interferisca con le letture).
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